خالص سازی لاکتوپراکسیداز گاوی و تثبیت آن توسط پلیمر پلی آنیلین

پایان نامه
چکیده

آنزیم لاکتوپراکسیداز یکی از فراوانترین آنزیم های موجود در شیر می باشد. این آنزیم یک گلیکو پروتئین حاوی گروه پروستاتیک هم و 595 اسید آمینه با وزن مولکولی 68 کیلودالتون است. لاکتوپراکسیداز اکسیداسیون هالید ها و سودوهالیدهایی مانند تیوسیانات را توسط پراکسید هیدروژن کاتالیز می کند و مواد آنتی باکتریال تولید می کند که باعث غیر فعال شدن طیف وسیعی از میکروب ها می شود . این آنزیم به واسطه خاصیت آنتی باکتریالی که دارد به طور گسترده در صنایع مختلف از جمله صنایع غذایی ، دارویی ، بهداشتی و همچنین در زمینه های پزشکی مورد استفاده قرار گرفته است. در این تحقیق بعد از تخلیص آنزیم لاکتوپراکسیدازاز شیرگاو و تعیین شرایط اپتیمم غلظت ، زمان و ph برای تثبیت آن بر روی پلیمر پلی آنیلین ، عمل تثبیت انجام شد و خصوصیات عملکردی آنزیم تثبیت شده در ph و دماهای مختلف با استفاده از پراکسید هیدروژن و abts به عنوان سوبسترا توسط اسپکتروسکوپی مرئی – فرابنفش درطول موج 412 نانومترمورد ارزیابی قرار گرفت . اتصال موثر(binding efficiency) برای آنزیم تثبیت شده بر اساس درصد آنزیم تثبیت شده فعال نسبت به درصد پروتئین متصل شده محاسبه گردید. همچنین میزان اتصال موثر برای تثبیت در بهترین شرایط 91 درصد بود ( نشاندهنده این است که 91 درصد از فعالیت آنزیمی بعد از تثبیت حفظ شده است ). بررسی خصوصیات آنزیم تثبیت شده بر روی پلیمر و مقایسه آن با آنزیم آزاد نشان داد که تثبیت آنزیم با استفاده از پلیمربر روی پایداری آن تاثیر گذاشته است. بررسی میزان فعالیت آنزیم آزاد و تثبیت شده در دما ، حلال های آلی و phهای مختلف نشان داد که آنزیم تثبیت شده پایداری بیشتری نسبت به آنزیم آزاد دارد. همچنین قابلیت استفاده مجدد از آنزیم تثبیت شده بالاست . بررسی توپوگرافی سطح پلیمر پلی آنیلین و پلیمرتثبیت شده با آنزیم توسط میکروسکوپ afm به خوبی نشستن آنزیم بر روی پلیمر را نشان داد. در مجموع این طور می توان نتیجه گرفت که پلی آنیلین توانایی تثبیت آنزیم لاکتوپراکسیداز را دارد و تثبیت آنزیم بر روی آن همراه با تغییردر خصوصیات آنزیم وافزایش پایداری در مقابل شرایط نامساعد است. این امر احتمالا ناشی از تغییر در سطح ساختاری آنزیم است. ازآنزیم تثبیت شده می توان در بیوسنسورها و صنایع غذایی استفاده کرد.

منابع مشابه

خالص سازی و تثبیت آنزیم لاکتوپراکسیداز استخراج شده از شیر شتر توسط آلژینات سدیم

زمینه مطالعه: لاکتو پراکسیداز آنزیمی از خانواده اکسیدوردوکتاز می‌باشد؛ که عامل مهم ضد باکتری محسوب می‌گردد. بدین علت بعنوان نگهدارنده مواد غذایی و آرایشی بهداشتی کاربرد دارد. تثبیت لاکتو پراکسیداز مزیت‌های زیادی از قبیل، جدا سازی آسان،کاهش هزینه تولید از طریق به کار گیری مجدد و نیز کنترل اثر آنزیم دارد. هدف: خالص سازی و تثبیت آنزیم لاکتوپراکسیداز استخراج شده از شیر شترتوسط پلیمر آلژینات سدیم. ر...

متن کامل

تهیه کلوئیدی نانوکامپوزیت پلی آنیلین - پلی وینیل الکل- سیلیسیم دی اکسید و بررسی خواص ضدخوردگی آن

پلی ­آنیلین (PANI) به دلیل قیمت کم، راحتی دسترسی به مواد اولیه، سنتز آسان، پایداری محیطی خوب، رسانایی الکتریکی قابل­ کنترل و خواص اکسایشی، از جالب ترین پلیمرهای رساناست. در سال­ های گذشته نشان داده شد، پلیمرهای رسانای الکتریکی نظیر پلی ­آنیلین می­ توانند به­ عنوان پوشش محافظ خوردگی استیل به دلیل تشکیل لایه اکسید روی سطح فلز، استفاده شوند. فرایندپذیری ضعیف پلی­ آنیلین به سبب خواص ضعیف مکانیکی و ...

متن کامل

بررسی پارامترهای جذب و بازیابی کروم (6+) از محلول آبی توسط جاذب پلی آنیلین – کربن فعال

در این مطالعه از یک پلیمر رسانا به نام پلی‌آنیلین که بر روی سطح کربن فعال سنتز شده است، به‌عنوان یک جاذب برای حذف کروم(۶+)از محلول‌های آبی استفاده شده است. آزمایش‌ها در حالت ناپیوسته با متغیرهایی از قبیل: مقدار غلظت اولیه‌ی کروم )۶+(، مقدار جاذب، زمان تعادل جذب، مقدار p‌H اولیه‌ی محلول، و دما انجام شده است. زمان تعادل جذب برابر ۴۵ دقیقه به‌دست آمده است، ولی برای حصول اطمینان، زمان جذب در آزمایش...

متن کامل

حذف فتوکاتالیستی اتیلن دی‌کلراید توسط نانوکامپوزیت پلی آنیلین-دی اکسید تیتانیم تثبیت شده بر سطح گلوله‌های شیشه‌ای: بهینه‌سازی به روش سطح پاسخ-طراحی مرکب مرکزی

اتیلن دی‌کلراید یکی از مهم‌ترین هیدروکربن‌های کلرینه در پساب صنایع پتروشیمی است که عمدتاً برای تولید مونومر وینیل کلراید که پیش ماده اصلی تولید پی‌وی‌سی است، استفاده می‌شود. ایران یکی از بزرگ‌ترین تولیدکنندگان پی‌وی‌سی در جهان است. در فرایند تولید ۱۰۰۰ کیلوگرم اتیلن دی‌کلراید، در حدود 4/0 مترمکعب پساب تولید می‌شود که حاوی ۵۰ تا ۲۰۰ میلی‌گرم در لیتر اتیلن دی‌کلراید است. در این پژوهش، روش ...

متن کامل

بررسی حذف کروم شش ظرفیتی از محلول های آبی توسط نانوکامپوزیت نشاسته-مونت موریلونیت/پلی آنیلین

نانو کامپوزیت هیبریدی نشاسته-مونت موریلونیت/پلی آنیلین به عنوان جاذبی ارزان و زیست سازگار به روش پلیمریزاسیون اکسیداسیونی شیمیایی سنتز شد و از آن برای حذف کروم(VI)  از محلول های آبی استفاده گردید. ساختار و مورفولوژی نانوکامپوزیت تهیه شده با استفاده از طیف سنجی تبدیل فوریه مادون قرمز(FT-IR)  ، میکروسکوپ الکترونی روبشی(SEM) و جهت ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه رازی - پژوهشکده علوم زیستی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023